MM_FS_CNJ_0097 出口肉及肉制品中丁烯磷残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0097出口 肉 肉制品 丁烯磷 残留量 气相色谱法 外标法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0097

      出口肉及肉制品中丁烯磷残留量检验方法

1.适用范围

    本方法适用于出口猪肉中丁烯磷残留量的检验。

2.原理概要

    试样中残留的丁烯磷用乙腈-水提取，提取液再用三氯甲烷液-液分配净化提取。三氯甲烷提取液经浓缩，残渣用正己烷浸出并经弗罗里硅土柱净化后，用配有火焰光度检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

    乙腈；

    三氯甲烷：重蒸馏；

    正己烷：重蒸馏；

    丙酮：重蒸馏；

    乙酸锌；

    乙腈-水(1＋1)；

    丙酮-正己烷(5＋95)；

    丙酮-正己烷(20＋80)；

    无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后贮于密闭容器中备用；

    助滤剂：Celite 545，使用前用乙腈-水(1＋1)洗涤两次，每次浸泡半小时；

    弗罗里硅土：80～100目，650℃灼烧4h，冷却后贮于密闭容器中。使用前在130℃下烘4h，冷却后加入5%水脱活，加盖振摇，在密闭容器中存放12h后并在36h内使用；

    硫酸钠溶液：20g/L水溶液；

    丁烯磷标准品：纯度≥99%；

    丁烯磷标准溶液：准确称取适量的丁烯磷标准品，用丙酮配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，再根据需要用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器

    气相色谱仪并配有火焰光度检测器，磷滤光片(526nm)；

    振荡器；

    离心机；

    真空旋转蒸发器；

    超声波提取器；

    混合器；

    水浴锅；

    布氏漏斗；

    离心管：玻璃，具塞，50mL；

    层析柱：16cm×1.6cm(内径)，具砂芯。柱内先装1.5g无水硫酸钠，再装2.0g弗罗里硅土，顶部再装2.5g无水硫酸钠；

    微量注射器：10μL。

4.试样的抽取与制备

4.1.检验批

    以不超过2500件为一检验批。

    同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.3.抽样方法

    按规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品，其总量不少于2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。

    如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者，则可用灭菌的锋利刀在抽出的包件中，每件割取不少于100g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。

4.4.试样制备

    从原始样品中分取出约1kg，经捣碎机充分捣碎，混匀，均分成两份，分别装入清洁的容器内，作为试样。加封并标明标记。

4.5.试样保存

    将试样于－18℃以下冷冻保存。

注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.1.提取

    称取约16g试样(精确至0.1g)于150mL的锥形瓶中，加入70mL乙腈-水(1＋1)和1.0g乙酸锌，加塞，先在振荡器上振荡45min。再放在超声波提取器中抽提10min。样液通过均匀铺盖约1.5g助滤剂的布氏漏斗抽滤。用3×10mL乙腈洗涤瓶中的残渣，每次放入超声波提取器中抽提1min，以后同上操作。合并滤液于100mL容量瓶中，用乙腈-水(1＋1)稀释至刻度。样液再经干滤纸快速过滤，弃去前段10mL滤液后收集约30mL滤液。

    准确量取25mL滤液于离心管中，加入10mL硫酸钠溶液及5mL三氯甲烷。加塞在混合器上混合2min后，于3000r/min下离心2min。用滴管将下层三氯甲烷移入离心管中。于原溶液中再分别加入3mL、2mL三氯甲烷，以后同上操作。合并三氯甲烷层，在50℃下，用旋转蒸发器减压浓缩近干后用空气流浓缩至干，加入2mL正己烷以溶解残渣。

5.2.净化

    在层析柱中，加入20mL正己烷，待液面降至无水硫酸钠层时，将上述溶液加入柱中，待液面降至无水硫酸钠层时，用5mL正己烷洗涤器皿，加入柱内，继续用15mL丙酮-正己烷(5＋95)淋洗，弃去以上流出液。最后用30mL丙酮-正己烷(20＋80)洗脱(流速约1.5mL/min)，收集洗脱液于离心管中，在40℃下用旋转蒸发器减压蒸发至干。准确加入1mL正己烷以溶解残渣，溶液供气相色谱测定。

5.3.测定

5.3.1.气相色谱条件

色谱柱：石英毛细管柱，农残1号(兰州化学物理研究所)，25m×0.53mm(内径)，或相当者；

载气：氮气，纯度≥99.99%，10mL/min；

尾吹气：氮气，纯度≥99.99%，20mL/min；

氢气：75mL/min；

空气：100mL/min；

色谱柱温度：程序升温，180℃保持1min，以10℃/min速度升至220℃，恒温至峰出完；

进样口温度：220℃；

检测器温度：280℃；

进样量：1～5μL。

5.3.2.色谱测定

根据样液中丁烯磷含量情况，选定峰高与样液相近的标准工作溶液。标准工作液和样液中丁烯磷的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准工作液与样液应等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，丁烯磷的保留时间约为3.9min。

5.4.空白试验

    除不称取试样外，均按上述测定步骤进行。

6.结果计算

    用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中丁烯磷的残留含量：

式中：X——试样中丁烯磷残留含量，mg/kg；

h——样液中丁烯磷的色谱峰高，mm；

h_s——标准工作液中丁烯磷的色谱峰高，mm；

c——标准工作液中丁烯磷的浓度，μg/mL；

V——样液最终定容体积，mL；

m——最终样液所代表的试样量，g。

注：计算结果需将空白值扣除。

7.低限、回收率的测定

7.1.测定低限

    本方法的测定低限为0.02mg/kg。

7.2.回收率

    猪肉中丁烯磷的添加浓度及其回收率的实验数据：

0.02mg/kg时，回收率为97.0%；

0.05mg/kg时，回收率为100%；

2.00mg/kg时，回收率为102%。

8.来源：

    SN  01—1997