AMAMFSIs0159肉 肉制品 羟(基)脯氨酸 光谱法

AM-AM-FS-Is-0159

肉和肉类制品——羟(基)脯氨酸含量的测定

1．适用范围：

本方法可用于各类肉和肉制品，包括家禽的羟(基)脯氨酸含量的测定。本标准适用于羟（基）脯氨酸含量低于0.5%（m/m）的肉及肉制品的测定。

2．原理概要：

将试样在硫酸中于105℃进行水解。水解产物过滤和稀释。用氯胺-T氧化羟(基)脯氨酸，而后使其与对二甲胺苯甲醛反应生成红色化合物。在波长558nm处进行光谱测定。

3．主要仪器和试剂：

3.1.仪器

常规实验室仪器，主要有：电碎肉机，200ml圆底或平底水解烧瓶，烘箱(105℃±5℃)，12.5㎝滤纸盘，pH计，铝箔或不透明塑料箔，水浴，光度计或光电比色计，玻璃池，分析天平(精确至0.001g)，250ml容量瓶，观察玻璃(直径5～6cm)。

3.2.主要试剂

所有试剂应为分析纯。水要用蒸馏水、软化水或至少同等纯度的水。主要试剂有：浓度约3mol/L的硫酸溶液，缓冲溶液(pH6.8，26.0g水合酒石酸，14g氢氧化钠，78g无水合乙酸钠溶于500ml水中，加入250ml正丙醇，然后定容至1L，避光保存)，1.41%氯胺-T试剂（溶于缓冲溶液中，现配现用），生色剂（10g对二甲胺苯甲醛溶于35ml 60%高氯酸溶液中，用正丙醇定容至100ml），羟(基)脯氨酸标准溶液。

4．过程简述：

4.1.样品制备

重要的一点是取样应具有代表性，样品在运输或储存时未被破坏或改变。取样可参见ISO 3100-1。有代表性的样品量至少要200g。分生肉和肉制品，以及熟肉和熟肉制品分别进行处理。

称取4g试样（精确至0.001g），放入水解烧瓶。加入30ml±1ml硫酸，并在105℃下水解16小时。待水解产物进行过滤和洗涤。

4.2.测试

定量移取洗涤物，加入氯胺-T和生色剂，并在558nm±2nm处进行光谱吸收测定。需做空白试验和校准曲线。

5．来源：

国际标准化组织，ISO 3496：1994(E)